• Facebook
  • linkedin
  • youtube

W:Brother, η αντίστροφη μεταγραφή ολοκληρώθηκε και τελικά το τελευταίο βήμα – φθορίζουσα ποσοτική PCR!Γεια σου, αδερφέ, τι είναι η ποσοτική PCR σε πραγματικό χρόνο;
M:PCR ξέρεις πάντα, σωστά;
W: Ξέρετε, η PCR είναι η αλυσιδωτή αντίδραση πολυμεράσης και είναι μια τεχνολογία που αυξάνει το DNA!
Μ: Είναι σχεδόν… Είναι μια τεχνική μέθοδος για την ενίσχυση της αλληλουχίας στόχου σε περισσότερες από ένα εκατομμύριο φορές μέσω συγκεκριμένων εκκινητών, αλλά αυτό δείχνει μόνο την παρουσία ή την απουσία της αλληλουχίας στόχου και δεν μπορεί να προσδιορίσει την ποσότητα του αρχικού προτύπου.Η ποσοτική PCR φθορισμού είναι μια τεχνική μέθοδος που αναπτύχθηκε για την επίλυση αυτού του προβλήματος.Η PCR πραγματικού χρόνου και η ποσότητα PCR (qPCR) αναφέρονται γενικά σε αυτήν.
W: Η διαφορά από την συνηθισμένη PCR έγκειται στον ποσοτικό προσδιορισμό του φθορισμού;
Μ: Ναι, δηλαδή, στο στάδιο επέκτασης κάθε κύκλου PCR, ανιχνεύεται η ένταση του σήματος φθορισμού και η αρχική ποσότητα προτύπου μπορεί να υπολογιστεί σύμφωνα με την αλλαγή της έντασης του σήματος.
W: Είναι τόσο περίπλοκο!Πρέπει να το υπολογίσω μόνος μου;
Μ: Αυτό απαιτεί να μαθαίνεις αργά, είναι καλύτερο να μπορείς να κατανοήσεις την αρχή.Τώρα μπορείτε να εστιάσετε πρώτα στην τιμή CT, η οποία είναι σχετικά διαισθητικά πειραματικά δεδομένα και το μέγεθός της αντιστοιχεί στο μέγεθος της αρχικής ποσότητας προτύπου.Υπάρχουν επίσης γραφήματα όπως καμπύλες ενίσχυσης και καμπύλες τήξης.Έχουν τον τελευταίο λόγο για το αν το πείραμά σας είναι επιτυχές ή όχι.
W: Α, αδερφέ.Τότε θα κάνω το πείραμα qPCR!
Μ: Δώστε ιδιαίτερη προσοχή να μην προσθέσετε πρότυπα στην περιοχή του αντιδραστηρίου, διαφορετικά το αχρησιμοποίητο μείγμα σας θα μολυνθεί εύκολα!
W: Κατάλαβα!

1

Real Time PCR Easyᵀᴹ-SYBR Green I Kit

Υψηλότερη απόδοση, μεγαλύτερη ειδικότητα
Υψηλή ευαισθησία, καλή συμβατότητα

2 3


Ώρα δημοσίευσης: 22 Ιουλίου 2022