Εξακολουθείτε να χρησιμοποιείτε το Trizol για την εξαγωγή RNA;
Θεέ μου, μην με αφήσεις να ανησυχώ για την υγεία σου!
Το Trizol κοντεύει να περιθωριοποιηθεί, μη μου πεις ότι είσαι ακόμα στο σκοτάδι;

Το κύριο συστατικό του αντιδραστηρίου Trizol είναι η φαινόλη και οργανικά αντιδραστήρια όπως το χλωροφόρμιο προστίθενται επίσης στην πειραματική λειτουργία.Η μακροχρόνια έκθεση θα προκαλέσει βλάβη στην υγεία σας, ειδικά η άμεση επαφή με το δέρμα μπορεί να προκαλέσει σοβαρά χημικά εγκαύματα και μόνιμες ουλές.

Υπό κανονικές συνθήκες, οι συνεργάτες του εργαστηρίου μπορούν να μειώσουν τους κινδύνους μόνο αν οπλιστούν πλήρως (φορώντας εργαστηριακές μανδύες, γάντια και μάσκες).

Και η συμβουλή μου προς εσάς είναι: αντικαταστήστε το Trizol απευθείας για να αποφύγετε βλάβη από την πηγή.

1. Το προϊόν πρώτης γενιάς εξαγωγής RNA
Κυκλοφορεί το 1987 (αντιδραστήρια Trizol)

πλεονέκτημα:
Πιο πλήρης εξαγωγή

Μειονεκτήματα:
Απαιτούνται τοξικά αντιδραστήρια όπως ισοθειοκυανική γουανιδίνη-φαινόλη-χλωροφόρμιο.
Δύσχρηστη λειτουργία.
Ανάγκη χρήσης DNase για την αφαίρεση μόλυνσης από DNA

2.Το προϊόν δεύτερης γενιάς της εκχύλισης RNA
Κυκλοφορεί το 1994 (QIAGEN RNeasy και τα περισσότερα εγχώρια προϊόντα)

πλεονέκτημα:
Υιοθετείται φυγοκεντρική μέθοδος στήλης, η οποία είναι εύκολη στη λειτουργία.

Μειονέκτημα:
Χρειάζεται φυγοκέντρηση για την απομάκρυνση των υπολειμμάτων ιστού
Ανάγκη χρήσης DNase για την αφαίρεση μόλυνσης από DNA

3.Το προϊόν τρίτης γενιάς εξαγωγής RNA
Κυκλοφορεί το 2005 (QIAGEN RNeasy Plus και ForegeneΠροϊόντα της σειράς καθαρισμού RNA)

πλεονέκτημα:
Χρησιμοποιήστε απευθείας τη στήλη αφαίρεσης DNA για να αφαιρέσετε ταυτόχρονα DNA και υπολείμματα ιστού, εξοικονομώντας χρόνο και προσπάθεια.
Ασφαλές και βολικό, δεν χρειάζεται να προσθέσετε στήλη φίλτρου και DNase για να αφαιρέσετε εύκολα τις ακαθαρσίες και να αποφύγετε τη μόλυνση του DNA

Ας δούμε τις λειτουργικές διαφορές μεταξύ του προϊόντος πρώτης γενιάς (Trizol), του προϊόντος δεύτερης γενιάς (RNeasy) και του προϊόντος τρίτης γενιάς (Foregene) εξαγωγής RNA:

Η λειτουργία στο σχήμα είναι σαφής: το προϊόν τρίτης γενιάς έχει προφανή πλεονεκτήματα

Τρεις μόνο λέξεις για να περιγράψω: εύκολο!Γρήγορα!Ασφάλεια

Το διάγραμμα PK των πειραματικών αποτελεσμάτωνΓιατα προϊόντα πρώτης γενιάς, δεύτερης και τρίτης γενιάς της εκχύλισης RNA:

1. Eηλεκτροφορετογράφημα

Η πρώτη γενιά (1: Trizol)
Η δεύτερη γενιά (2:QIAGEN RNeasy)
Η τρίτη γενιά (3: QIAGEN RNeasy plus, 4: Foregene)

Τι είδους προϊόν είναι καλό, θα γνωρίζετε συγκριτικά
Το RNA εξήχθη χρησιμοποιώντας το κιτ Foregene
Όχι μόνο υψηλή συγκέντρωση αλλά και καλή ακεραιότητα

2.qPCR γράφημα (γραφική παράσταση καμπύλης ενίσχυσης)

Η πρώτη γενιά (Trizol)

Η δεύτερη γενιά (γαλάζιο του ουρανούπου σημαίνειQIAGEN RNeasy-, κόκκινοπου σημαίνειQIAGEN RNeasy +)

Η τρίτη γενιά (μπλε σημαίνει Foregene, πράσινο σημαίνει QIAGEN RNeasy plus)

(Σημείωση: Το γράφημα QIAGEN RNeasy δεύτερης γενιάς του qPCR σημαίνει ότι το κιτ δεν προσθέτει DNase και δεν αφαιρεί τη μόλυνση του DNA. Επομένως, η CT είναι υψηλότερη και το αποτέλεσμα δεν είναι ακριβές. QIAGEN RNeasy + σημαίνει ότι έχει προστεθεί DNase και η μόλυνση DNA έχει αφαιρεθεί και το αποτέλεσμα είναι ακριβές)

Είτε πρόκειται για ηλεκτροφορητογραφία είτε για γραφική παράσταση καμπύλης ποσοτικής ενίσχυσης PCR, η ποιότητα των προϊόντων Foregene δεν είναι κατώτερη από τα ξένα εισαγόμενα προϊόντα.