Η γέννηση της PCR
PCR (αλυσιδωτή αντίδραση πολυμεράσης)
Έχουν περάσει περισσότερα από 30 χρόνια από την εφεύρεση της αλυσιδωτής αντίδρασης πολυμεράσης.Για περισσότερα από 30 χρόνια, αφού πολλοί μελετητές σε όλο τον κόσμο συνεχίζουν να συμπληρώνουν και να βελτιώνονται, η τεχνολογία PCR έχει γίνει η πιο ευρέως χρησιμοποιούμενη και πιο σημαντική μέθοδος βασικής έρευνας σε ολόκληρο το πεδίο των Life Sciences.
Τα TouchDown PCR, Real-Time PCR, Multi PCR κ.λπ. που αναπτύχθηκαν με βάση την ευρεία εφαρμογή της παραδοσιακής τεχνολογίας PCR, καθώς και η νεοεμφανιζόμενη ψηφιακή PCR (ψηφιακή PCR), έχουν εμπλουτίσει σε μεγάλο βαθμό τις ερευνητικές μεθόδους της πλειοψηφίας των επιστημονικών ερευνητών και επιτάχυνε σημαντικά τη διαδικασία ανάπτυξης των σύγχρονων Επιστημών της Ζωής, ιδιαίτερα της μοριακής βιολογίας, που έχει συνεισφέρει σημαντικά στη μελέτη της ανθρώπινης ζωής και της φύσης.
Ελαττώματα της παραδοσιακής τεχνολογίας PCR
Σύνθετος διαχωρισμός νουκλεϊκών οξέων καιεξαγωγή:
★ Παραδοσιακή τεχνολογία PCR: απαιτείται
★ Τεχνολογία προερχόμενη από PCR: απαιτείται
★ Δείγματα DNA και RNA: μεγάλες διαφορές, δύσκολες απαιτήσεις λειτουργίας
★ Κίνδυνοι για το σώμα: τα τοξικά αντιδραστήρια βλάπτουν το σώμα
Η παραδοσιακή τεχνολογία PCR και η τεχνολογία παραγώγων έχουν προαπαιτούμενο - διαχωρισμό και καθαρισμό νουκλεϊκού οξέος
Οποιοδήποτε βιολογικό δείγμα πρέπει να περάσει από μια σειρά περίπλοκων και κουραστικών δειγμάτων επεξεργασίας για να ληφθούν δείγματα νουκλεϊκών οξέων που πληρούν τις απαιτήσεις της τεχνολογίας PCR.
Ο διαχωρισμός και η εξαγωγή DNA και RNA ήταν πάντα ένα βασικό έργο που οι σχετικοί επιστημονικοί ερευνητές πρέπει να επαναλαμβάνουν καθημερινά.
Λόγω των τεράστιων διαφορών μεταξύ των δειγμάτων, οι διαδικασίες διαχωρισμού και εκχύλισης του DNA και του RNA είναι επίσης πολύ διαφορετικές.Αυτή η εργασία απαιτεί υψηλό επίπεδο τεχνικής επάρκειας για τους χειριστές.Οι παραδοσιακές τεχνικές διαχωρισμού και εκχύλισης απαιτούν μακροχρόνια επαφή με ορισμένα εξαιρετικά τοξικά χημικά αντιδραστήρια.Θα προκαλέσει μη αναστρέψιμη ζημιά στο σώμα του χειριστή, ακόμη και να προκαλέσει άμεση ζημιά κατά τη διάρκεια του πειράματος.
Ταυτόχρονα, για όσους έχουν μεγάλο αριθμό δειγμάτων προς μελέτη, ο διαχωρισμός και η εκχύλιση των νουκλεϊκών οξέων είναι μια εργασία έντασης εργασίας.
Τα κιτ απομόνωσης και εκχύλισης νουκλεϊκού οξέος στην αγορά είναι πλέον ώριμα και υπάρχουν πολλές μάρκες, αλλά είναι περίπου ίδιες.Είτε πρόκειται για φυγοκεντρικό κιτ στήλης μεμβράνης πυριτικής πηκτής είτε για κιτ μεθόδου μαγνητικής σφαιριδίων, χρειάζεται πολύς χρόνος και είναι δαπανηρή.Εκτός από το κόστος του κιτ, υπάρχουν και ειδικές απαιτήσεις για εργαστηριακό εξοπλισμό.Ο αυτοματοποιημένος σταθμός εργασίας που χρησιμοποιείται στη μέθοδο των μαγνητικών σφαιριδίων είναι ένας πολύ τυπικός εξοπλισμός μεγάλης κλίμακας υψηλής αξίας, ο οποίος αποτελεί τεράστια δαπάνη για το εργαστήριο.
Συνοψίζοντας
Πριν από τη διεξαγωγή πειραμάτων PCR, η προεπεξεργασία των δειγμάτων είναι αναπόφευκτη και πάντα πονοκέφαλος για τους ερευνητές.Ο τρόπος επίλυσης αυτού του προβλήματος και το εάν τα πειράματα PCR μπορούν να πραγματοποιηθούν χωρίς διαχωρισμό και εκχύλιση νουκλεϊκών οξέων ήταν πάντα η σκέψη της πλειοψηφίας των επιστημονικών ερευνητών και του προσωπικού κλινικών εργαστηρίων.
Η λύση του Foregene
Μετά από χρόνια επίπονης έρευνας για την τεχνολογία Direct PCR και τα σχετικά κιτ, η Forgene έσπασε με επιτυχία πολλά σημεία συμφόρησης και πέτυχε με επιτυχία την άμεση PCR για πολλούς τύπους διαφορετικών δειγμάτων με ισχυρή αντοχή και προσαρμοστικότητα, επιτρέποντας στους ερευνητές να απαλλαγούν από τον περίπλοκο και επικίνδυνο διαχωρισμό και την εξαγωγή νουκλεϊκών οξέων.Αυτό θα μειώσει σημαντικά την ένταση εργασίας όλων, θα επιταχύνει τη διαδικασία του πειράματος και θα εξοικονομήσει κόστος επιστημονικής έρευνας και δοκιμών.
Η κατανόηση και η γνώση του DirectPCR από την Forgene
Πρώτον, η τεχνολογία DirectPCR είναι μια τεχνολογία άμεσης PCR για διάφορους βιολογικούς ιστούς δείγματος.Κάτω από αυτήν την τεχνική συνθήκη, δεν υπάρχει ανάγκη διαχωρισμού και εκχύλισης νουκλεϊκών οξέων και το δείγμα ιστού χρησιμοποιείται απευθείας ως αντικείμενο και οι εκκινητές γονιδίου στόχου προστίθενται για αντίδραση PCR.
Δεύτερον, η τεχνολογία DirectPCR δεν είναι μόνο μια παραδοσιακή τεχνολογία ενίσχυσης προτύπου DNA, αλλά περιλαμβάνει επίσης PCR αντίστροφης μεταγραφής προτύπου RNA.
Τρίτον, η τεχνολογία DirectPCR όχι μόνο εκτελεί άμεσα τυπικές ποιοτικές αντιδράσεις PCR σε δείγματα ιστού, αλλά περιλαμβάνει επίσης αντιδράσεις qPCR σε πραγματικό χρόνο, κάτι που απαιτεί από το σύστημα αντίδρασης να έχει ισχυρή ικανότητα να αντιστέκεται στις παρεμβολές φθορισμού υποβάθρου και να ανταγωνίζεται τους ενδογενείς αποσβεστήρες φθορισμού.
Τέταρτον, τα δείγματα ιστού που στοχεύονται από την τεχνολογία DirectPCR απαιτούν μόνο την απελευθέρωση προτύπων νουκλεϊκού οξέος και δεν αφαιρούν πρωτεΐνες, πολυσακχαρίτες, ιόντα άλατος κ.λπ. που παρεμβαίνουν στην αντίδραση PCR.Αυτό απαιτεί η πολυμεράση νουκλεϊκού οξέος και το μίγμα PCR στο σύστημα αντίδρασης να έχουν εξαιρετική αντι-αναστρεψιμότητα και προσαρμοστικότητα και μπορεί να εξασφαλίσει τη δραστηριότητα του ενζύμου και την ακρίβεια αντιγραφής υπό πολύπλοκες συνθήκες.
Πέμπτον, τα δείγματα ιστού που στοχεύονται από την τεχνολογία DirectPCR δεν έχουν υποβληθεί σε καμία επεξεργασία εμπλουτισμού νουκλεϊκού οξέος και η ποσότητα του εκμαγείου είναι πολύ μικρή, γεγονός που απαιτεί εξαιρετικά υψηλή ευαισθησία και αποτελεσματικότητα ενίσχυσης του συστήματος αντίδρασης.
συμπέρασμα
Η τεχνολογία DirectPCR είναι μια από τις πιο σημαντικές τεχνολογικές εξελίξεις και καινοτομίες τα τελευταία 30 χρόνια από τη γέννηση της τεχνολογίας PCR.Η Forgene έχει και θα συνεχίσει να είναι πρωτοπόρος και καινοτόμος αυτής της τεχνολογίας.
Η προοπτική εφαρμογής της τεχνολογίας DirectPCR είναι πολύ ευρεία.Η συνεχής βελτίωση και προώθηση αυτής της τεχνολογίας θα φέρει σίγουρα ανατρεπτικές αλλαγές στο έργο της επιστημονικής έρευνας και επιθεώρησης.Αυτή είναι μια επανάσταση στην τεχνολογία PCR.
Ώρα ανάρτησης: Φεβ-21-2017
