1: Αντικαταστήστε τα πειραματικά αναλώσιμα εγκαίρως

Ρυθμίστε τον αρνητικό έλεγχο (NTC) και επαναλάβετε το πολλές φορές.Μόλις διαπιστωθεί ότι υπάρχει μόλυνση του προϊόντος PCR στο εργαστήριο, αντικαταστήστε όλα τα πειραματικά αναλώσιμα εγκαίρως.Όπως: αραιώστε εκ νέου και προετοιμάστε τους εκκινητές, αποστειρώστε ξανά το άκρο της πιπέτας, το σωλήνα EP, το ddH2O κ.λπ., αντικαταστήστε με μια νέα πιπέτα και δανειστείτε προσωρινά άλλα εργαστήρια για να εκτελέσετε πειράματα PCR.Το μολυσμένο εργαστήριο αερίζεται και ακτινοβολείται με υπεριώδεις ακτίνες έως ότου εξαλειφθεί η μόλυνση του προϊόντος PCR πριν προχωρήσετε στο πείραμα.

2: Επέκταση του χρόνου έκθεσης στην υπεριώδη ακτινοβολία

Αξίζει να σημειωθεί ότι για την απομάκρυνση της μόλυνσης από το DNA, η τακτική υπεριώδης ακτινοβολία θα πρέπει να παραταθεί κατά 2 ώρες από το συνηθισμένο.Ακόμα κι έτσι, η επίδραση της ακτινοβολίας UV στην αφαίρεση μικρών θραυσμάτων (κάτω από 200bp) μόλυνσης από DNA δεν είναι ακόμα καλή.

Το υπεριώδες μήκος κύματος (nm) είναι γενικά 254/300 nm και αρκεί να ακτινοβοληθεί για 30 λεπτά.Θα πρέπει να σημειωθεί ότι κατά την επιλογή της υπεριώδους ακτινοβολίας για την εξάλειψη της μόλυνσης των υπολειμματικών προϊόντων PCR, θα πρέπει να λαμβάνεται υπόψη το μήκος του προϊόντος PCR και η κατανομή των βάσεων στην αλληλουχία του προϊόντος.Η υπεριώδης ακτινοβολία είναι αποτελεσματική μόνο για μεγάλα θραύσματα άνω των 500 bp και έχει μικρή επίδραση σε μικρά θραύσματα.

Κατά την υπεριώδη ακτινοβολία, οι βάσεις πυριμιδίνης στο προϊόν PCR θα σχηματίσουν διμερή.Αυτά τα διμερή μπορούν να τερματίσουν την επέκταση, αλλά δεν μπορούν όλες οι πυριμιδίνες στην αλυσίδα του DNA να σχηματίσουν διμερή και η ακτινοβολία UV μπορεί επίσης να σπάσει τα διμερή..Ο βαθμός σχηματισμού διμερούς εξαρτάται από το μήκος κύματος υπεριώδους ακτινοβολίας, τον τύπο του διμερούς πυριμιδίνης και την αλληλουχία των νουκλεοτιδίων δίπλα στη θέση του διμερούς.Επομένως, εάν τα ενισχυμένα με PCR θραύσματα είναι μικρά, συνιστάται η χρήση του συστήματος μόλυνσης προϊόντος UNG anti-PCR.

3:Συνήθως χρησιμοποιούμενοι οδοκαθαριστές ρύπανσης DNA

Τα αερολύματα δημιουργούνται εύκολα όταν προστίθενται πιπέτες, κάτι που είναι δύσκολο να αποφευχθεί και θα καθιζάνει γρήγορα.Ως εκ τούτου, είναι αναμφίβολα μια καλή επιλογή η συχνή χρήση ειδικών καθαριστών ρύπανσης DNA για την πρόληψη της εξάπλωσης της ρύπανσης του DNA.

4:Χρησιμοποιήστε αντιρρυπαντικό σύστημα UNG

Αφού αφαιρεθεί η μόλυνση του προϊόντος PCR, το εργαστήριο δοκιμών μπορεί να χρησιμοποιήσει το σύστημα μόλυνσης προϊόντος UNG anti-PCR για να αποτρέψει τη μόλυνση του προϊόντος PCR.Σε γενικά εργαστήρια, μπορείτε να εκτελέσετε απλές πειραματικές κατατμήσεις, να διαχωρίσετε αυστηρά την περιοχή προϊόντων PCR από άλλες περιοχές, να θεσπίσετε ορισμένους εργαστηριακούς κανόνες και κανονισμούς και να πραγματοποιήσετε σχετική εκπαίδευση για να αποτρέψετε την εμφάνιση μόλυνσης του προϊόντος PCR.

Συστάσεις: Η δημιουργία ενός εύλογου εργαστηρίου PCR, η διατήρηση ενός καλού περιβάλλοντος PCR, η διαμόρφωση τυπικών διαδικασιών λειτουργίας PCR και η καλλιέργεια της αυστηρής συνείδησης λειτουργίας των πειραματιστών είναι τα κλειδιά για την πρόληψη ή τη μείωση της ρύπανσης των πειραμάτων PCR.