Το ένζυμο Hot-start Taq χρησιμοποιείται ευρέως.Σε σύγκριση με τη συνηθισμένη πολυμεράση DNA, το ένζυμο Taq θερμής εκκίνησης μπορεί να αποφύγει αποτελεσματικά κάποια μη ειδική ενίσχυση και το σχηματισμό διμερών εκκινητών και μπορεί να βελτιώσει αποτελεσματικά το ποσοστό επιτυχίας της ενίσχυσης του γονιδίου στόχου.Ειδικά στον τομέα των γενετικών δοκιμών, το ένζυμο Taq εν θερμώ εκκίνησης έχει αναγνωριστεί ως υποχρεωτικό πρότυπο στη βιομηχανία και η συνηθισμένη πολυμεράση DNA δεν πρέπει να χρησιμοποιείται.Όπως φαίνεται από τα παραπάνω, τα ένζυμα Taq θερμής εκκίνησης χρησιμοποιούνται ευρέως.Προς το παρόν, υπάρχουν πολλές μάρκες ενζύμων Taq θερμής εκκίνησης στην εγχώρια αγορά, αλλά δεν υπάρχουν πολλά ένζυμα Taq θερμής εκκίνησης με υψηλή ποιότητα.Αντιμέτωποι με τόσα πολλά προϊόντα ενζύμου Taq, πώς πρέπει να επιλέξουμε;

1. Επιλέξτε το ένζυμο Taq θερμής εκκίνησης με υψηλή απόδοση ενίσχυσης

Η αποτελεσματικότητα της ενίσχυσης PCR σχετίζεται στενά με την απόδοση του ενζύμου Taq.Αφού βελτιστοποιηθεί ένα καλό σύστημα ενζυμικής αντίδρασης Taq, η απόδοση ενίσχυσης είναι πάνω από 95%, και το εύρος ενίσχυσης της αρχικής ποσότητας εκμαγείου είναι ευρύ.Μπορεί να επιτευχθεί ικανοποιητική ενίσχυση όταν η περιεκτικότητα του γονιδίου στόχου είναι χαμηλή και δεν είναι εύκολο να δηλητηριαστεί όταν η ποσότητα του εκμαγείου είναι υψηλή και η περίοδος εκθετικής ενίσχυσης είναι μεγάλη.Για το ένζυμο Taq με κακή απόδοση, ακόμα κι αν το σύστημα αντίδρασης έχει βελτιστοποιηθεί πολλές φορές, η απόδοση ενίσχυσης εξακολουθεί να είναι μικρότερη από 90%, το σχήμα «S» της καμπύλης ενίσχυσης δεν είναι εμφανές, η κλίση είναι μικρή και η καμπύλη είναι επίπεδη.Όταν η ποσότητα του προτύπου είναι χαμηλή, δεν μπορεί να ενισχυθεί και όταν η ποσότητα του προτύπου είναι υψηλή, το εφέ ενίσχυσης δεν είναι ιδανικό.Επομένως, η επιλογή DNA πολυμερασών με υψηλή απόδοση ενίσχυσης είναι κρίσιμη για την επιτυχία της PCR και της qPCR.

2. Επιλέξτε ένζυμο Taq θερμής εκκίνησης με ισχυρή ενζυμική ισχύ

Η ενζυματική ισχύς του ενζύμου Taq σχετίζεται με την αποτελεσματικότητα ενίσχυσης.Γενικά, όσο ισχυρότερη είναι η ενζυματική ισχύς του ενζύμου Taq θερμής εκκίνησης, τόσο μεγαλύτερη είναι η περίοδος εκθετικής ανάπτυξης της ενίσχυσης PCR, τόσο πιο τυπική καμπύλη σχήματος S, τόσο μεγαλύτερη είναι η τιμή του σήματος φθορισμού και τόσο πιο κατάλληλη για ανίχνευση multiplex PCR.Οι επώνυμες πολυμεράσες DNA με ασθενή ενζυματική ισχύ μπορούν γενικά να υποστηρίξουν μόνο αντιδράσεις 2 πλεγμάτων.Όταν γίνονται αντιδράσεις 3-plex, η καμπύλη ενίσχυσης είναι χαμηλή, η τιμή του σήματος φθορισμού είναι χαμηλή και δεν υπάρχει τυπική καμπύλη ενίσχυσης, επομένως τα αποτελέσματα είναι δύσκολο να κριθούν.

3. Επιλέξτε ένα ένζυμο Taq θερμής εκκίνησης με υψηλή ευαισθησία

Σε γενικές γραμμές, η DNA πολυμεράση έχει υψηλή απόδοση ενίσχυσης και υψηλή ευαισθησία, αλλά υπάρχουν επίσης ασυνέπειες.Εάν η αφθονία του γονιδίου στόχου του προς ενίσχυση δείγματος είναι χαμηλή, συνιστάται η δοκιμή της ευαισθησίας ενίσχυσης του ενζύμου Taq.Η πιο συνηθισμένη μέθοδος ανίχνευσης είναι η διεξαγωγή 10-πλάσιας ή πενταπλάσιας βαθμιδωτής αραίωσης του θραύσματος πλασμιδίου γονιδίου στόχου, η διεξαγωγή ανίχνευσης PCR στη χαμηλότερη αραίωση και η επιλογή του ενζύμου Taq εν θερμώ εκκίνησης με υψηλότερη ευαισθησία ανίχνευσης.

Από τα παραπάνω φαίνεται ότι οι ερευνητές πρέπει να επιλέξουν σύμφωνα με τις δικές τους πειραματικές απαιτήσεις και τις δικές τους συνθήκες χρηματοδότησης.Είναι καλύτερο να κάνετε ένα πείραμα ενίσχυσης αραίωσης βαθμίδας για να ανιχνεύσετε την αποτελεσματικότητα και την ευαισθησία ενίσχυσης του ενζύμου Taq εν θερμώ εκκίνησης.

Ένα παράδειγμα Foregene's Taq DNA Πολυμεράση:

Foreasy HS Taq DNA Polymerase

Περιγραφή

Η Foreasy HS Taq DNA Polymerase είναι μια πολυμεράση DNA που εκφράζεται σε βακτήρια μηχανικής Escherichia coli με τεχνολογία ανασυνδυασμού γονιδίων.Το ένζυμο συνδυάζεται με ένα μοναδικό ρυθμιστικό διάλυμα αντίδρασης, το οποίο καθιστά το προϊόν εξαιρετικά ανθεκτικό και συμβατό και μπορεί να χρησιμοποιήσει απευθείας το προϊόν λύσης δείγματος (σύστημα Foregene Lysis) ως πρότυπο για αντιδράσεις ανίχνευσης.

Εφαρμογή

Ανίχνευση ποιοτικής PCR και ποσοτικής PCR καθαρισμένων προτύπων και μη καθαρισμένων προτύπων.

Ελεγχος ποιότητας

1.Δεν ανιχνεύτηκε δραστηριότητα εξωγενούς νουκλεάσης

2.Μέθοδος PCR για την ανίχνευση υπολειμματικού γονιδιωματικού DNA χωρίς ξενιστή

3. Μπορεί να ενισχύσει αποτελεσματικά γονίδια ενός αντιγράφου στο ανθρώπινο γονιδίωμα

4. Αποθηκεύστε σε θερμοκρασία δωματίου για μια εβδομάδα, μη εμφανείς αλλαγές δραστηριότητας

Λεπτομέρειες προϊόντος: https://www.foreivd.com/foreasy-hs-taq-dna-polymerase-product/