Ο οργανισμός συνεχίζει την έννοια της διαδικασίας «επιστημονική διαχείριση, υψηλή ποιότητα και υπεροχή της αποτελεσματικότητας, ανώτατος αγοραστής για την Κίνα Κατασκευαστής για 2× Concentrated Premix for Unpurified Sample Ποσοτική PCR Direct Multiplex Probe Qpcr Mix Plus U σε πραγματικό χρόνο.
Ο οργανισμός διατηρεί την έννοια της διαδικασίας «επιστημονική διαχείριση, υπεροχή υψηλής ποιότητας και αποτελεσματικότητας, ανώτατος αγοραστής γιαChina Taq DNA Polymerase and Qpcr, Η εταιρεία μας έχει άφθονη δύναμη και διαθέτει ένα σταθερό και τέλειο σύστημα δικτύου πωλήσεων.Ευχόμαστε να μπορούσαμε να δημιουργήσουμε υγιείς επιχειρηματικές σχέσεις με όλους τους πελάτες από το εσωτερικό και το εξωτερικό με βάση τα αμοιβαία οφέλη.
Αρχές σχεδίασης εκκινητών PCR σε πραγματικό χρόνο

Forward Primer και Reverse Primer

Για Real Time PCR, ο σχεδιασμός του εκκινητή είναι πολύ σημαντικός.Οι εκκινητές σχετίζονται με την ειδικότητα και την αποτελεσματικότητα της ενίσχυσης PCR και μπορούν να σχεδιαστούν με αναφορά στις ακόλουθες αρχές:

• Μήκος ασταριού: 18-30bp.
• Περιεκτικότητα GC: 40-60%.
• Τιμή Tm: Το λογισμικό σχεδιασμού Primer, όπως το Primer 5, μπορεί να δώσει την τιμή Tm του αστάρι.Οι τιμές Tm των εκκινητών ανάντη και κατάντη θα πρέπει να είναι όσο το δυνατόν πιο κοντά.Μπορεί επίσης να χρησιμοποιηθεί ο τύπος υπολογισμού Tm: Tm = 4 °C (G + C) + 2 °C (A + T).Κατά την εκτέλεση PCR, ως θερμοκρασία ανόπτησης επιλέγεται γενικά μια θερμοκρασία κάτω από την τιμή Tm εκκινητή των 5 °C (η αντίστοιχη αύξηση στη θερμοκρασία ανόπτησης μπορεί να αυξήσει την ειδικότητα της αντίδρασης PCR).
• Primers και προϊόντα PCR:

1. Το μήκος του προϊόντος ενίσχυσης PCR εκκινητή σχεδιασμού είναι κατά προτίμηση 100-150 bp.
2. Τα αστάρια σχεδιασμού στη δευτερεύουσα δομική περιοχή του προτύπου θα πρέπει να αποφεύγονται όσο το δυνατόν περισσότερο.
3. Αποφύγετε το σχηματισμό 2 ή περισσότερων συμπληρωματικών βάσεων μεταξύ των 3' άκρων των ανάντη και κατάντη εκκινητών.
4. Δεν μπορεί να υπάρχει τερματική βάση αστάρι 3′ με 3 επιπλέον διαδοχικά G ή C.
5. Οι ίδιοι οι εκκινητές δεν μπορούν να έχουν συμπληρωματικές δομές, διαφορετικά θα σχηματιστεί μια δομή φουρκέτας, επηρεάζοντας την ενίσχυση PCR.
6. Το ATCG θα πρέπει να κατανέμεται όσο το δυνατόν πιο ομοιόμορφα στην αλληλουχία εκκινητών και η 3' τερματική βάση θα πρέπει να αποφεύγεται ως T.

παράρτημα1: Γell DirectRT-qPCR Εξάρτημα κιτt πακέτο συμπληρωμάτων

1.Διάλυμα κυτταρικής λύσης

 Ο οργανισμός συνεχίζει την έννοια της διαδικασίας «επιστημονική διαχείριση, υψηλή ποιότητα και υπεροχή της αποτελεσματικότητας, ανώτατος αγοραστής για την Κίνα Κατασκευαστής για 2× Concentrated Premix for Unpurified Sample Ποσοτική PCR Direct Multiplex Probe Qpcr Mix Plus U σε πραγματικό χρόνο.
Κίνα Κατασκευαστής γιαChina Taq DNA Polymerase and Qpcr, Η εταιρεία μας έχει άφθονη δύναμη και διαθέτει ένα σταθερό και τέλειο σύστημα δικτύου πωλήσεων.Ευχόμαστε να μπορούσαμε να δημιουργήσουμε υγιείς επιχειρηματικές σχέσεις με όλους τους πελάτες από το εσωτερικό και το εξωτερικό με βάση τα αμοιβαία οφέλη.

Αρχές σχεδίασης εκκινητών PCR σε πραγματικό χρόνο

Forward Primer και Reverse Primer

Για Real Time PCR, ο σχεδιασμός του εκκινητή είναι πολύ σημαντικός.Οι εκκινητές σχετίζονται με την ειδικότητα και την αποτελεσματικότητα της ενίσχυσης PCR και μπορούν να σχεδιαστούν με αναφορά στις ακόλουθες αρχές:

• Μήκος ασταριού: 18-30bp.
• Περιεκτικότητα GC: 40-60%.
• Τιμή Tm: Το λογισμικό σχεδιασμού Primer, όπως το Primer 5, μπορεί να δώσει την τιμή Tm του αστάρι.Οι τιμές Tm των εκκινητών ανάντη και κατάντη θα πρέπει να είναι όσο το δυνατόν πιο κοντά.Μπορεί επίσης να χρησιμοποιηθεί ο τύπος υπολογισμού Tm: Tm = 4 °C (G + C) + 2 °C (A + T).Κατά την εκτέλεση PCR, ως θερμοκρασία ανόπτησης επιλέγεται γενικά μια θερμοκρασία κάτω από την τιμή Tm εκκινητή των 5 °C (η αντίστοιχη αύξηση στη θερμοκρασία ανόπτησης μπορεί να αυξήσει την ειδικότητα της αντίδρασης PCR).
• Primers και προϊόντα PCR:

1. Το μήκος του προϊόντος ενίσχυσης PCR εκκινητή σχεδιασμού είναι κατά προτίμηση 100-150 bp.
2. Τα αστάρια σχεδιασμού στη δευτερεύουσα δομική περιοχή του προτύπου θα πρέπει να αποφεύγονται όσο το δυνατόν περισσότερο.
3. Αποφύγετε το σχηματισμό 2 ή περισσότερων συμπληρωματικών βάσεων μεταξύ των 3' άκρων των ανάντη και κατάντη εκκινητών.
4. Δεν μπορεί να υπάρχει τερματική βάση αστάρι 3′ με 3 επιπλέον διαδοχικά G ή C.
5. Οι ίδιοι οι εκκινητές δεν μπορούν να έχουν συμπληρωματικές δομές, διαφορετικά θα σχηματιστεί μια δομή φουρκέτας, επηρεάζοντας την ενίσχυση PCR.
6. Το ATCG θα πρέπει να κατανέμεται όσο το δυνατόν πιο ομοιόμορφα στην αλληλουχία εκκινητών και η 3' τερματική βάση θα πρέπει να αποφεύγεται ως T.

παράρτημα1: Γell DirectRT-qPCR Εξάρτημα κιτt πακέτο συμπληρωμάτων

1.Διάλυμα κυτταρικής λύσης

Εγχειρίδια οδηγιών:

 Quick Easy Cell Direct RT-qPCR Kit-Taqman