Lnc-RT Heroᵀᴹ I(With gDNase) (Super Premix για σύνθεση cDNA πρώτης έλικος από lncRNA)
Προδιαγραφές
25×20μl Rxns, 50×20μl Rxns
Το Lnc-RT HeroTM I (With gDNase) είναι ένα σύστημα αντίστροφης μεταγραφής που έχει αναπτυχθεί ειδικά για το lncRNA για την γρήγορη αφαίρεση της μόλυνσης του γονιδιωματικού DNA.Το 5×gDNase Mix μπορεί να αφαιρέσει γρήγορα το υπόλοιπο γονιδίωμα στο RNA στους 42°C για 2 λεπτά, αποφεύγοντας αποτελεσματικά την παρεμβολή του γονιδιώματος στα αποτελέσματα της qPCR.
Το 5×L-RT HeroTM Mix περιέχει Foregene LncRNA Reverse Transcriptase που αναπτύχθηκε ειδικά από την Foregene, η οποία είναι ένας νέος τύπος ανάστροφης μεταγραφάσης ειδικά για lncRNA και άλλα μακροχρόνια πρότυπα συμπλέγματος RNA, με ισχυρότερη συγγένεια RNA και υψηλότερη απόδοση καταγραφής αναστροφής.Το βελτιστοποιημένο σύστημα κάνει τον ρυθμό αντίστροφης μεταγραφής ταχύτερο και μπορεί εύκολα να μεταγράψει πρότυπα RNA με υψηλή περιεκτικότητα σε GC και πολύπλοκη δευτερεύουσα δομή.Η σύνθεση του πρώτου κλώνου cDNA μπορεί να ολοκληρωθεί στους 42°C σε 15 λεπτά.
Εξαρτήματα κιτ
| 5× Μίγμα gDNase |
| 5× L-RT HeroTM Mix |
| Χωρίς RNase ddH2O |
| Οδηγίες |
Χαρακτηριστικά & πλεονεκτήματα
■Αποτελεσματική ικανότητα αφαίρεσης gDNA, η οποία μπορεί να αφαιρέσει το gDNA στο πρότυπο μέσα σε 2 λεπτά.
■ Μπορεί να αντιστρέψει αποτελεσματικά τη μεταγραφή του lncRNA.Όταν το προϊόν αντίστροφης μεταγραφής υποβάλλεται σε qPCR, η τιμή Ct είναι χαμηλότερη από αυτή του συμβατικού συστήματος αντίστροφης μεταγραφής.
■ Αποτελεσματικό σύστημα αντίστροφης μεταγραφής, χρειάζονται μόνο 15 λεπτά για να ολοκληρωθεί η σύνθεση του πρώτου κλώνου cDNA.
■ Σύνθετα πρότυπα: τα πρότυπα με υψηλό περιεχόμενο GC και σύνθετη δευτερεύουσα δομή μπορούν επίσης να αντιστραφούν με υψηλή απόδοση.
■ Σύστημα αντίστροφης μεταγραφής υψηλής ευαισθησίας, τα πρότυπα σε επίπεδο pg μπορούν επίσης να λάβουν cDNA υψηλής ποιότητας.
■ Το σύστημα αντίστροφης μεταγραφής έχει υψηλή θερμική σταθερότητα, η βέλτιστη θερμοκρασία αντίδρασης είναι 42℃, και εξακολουθεί να έχει καλή απόδοση αντίστροφης μεταγραφής στο 50℃.
Εφαρμογή κιτ
Σχετική ποσοτική ανάλυση lncRNA.
Απόλυτη ποσοτική ανάλυση lncRNA.
Μπορεί να αναλύσει γρήγορα και με ακρίβεια ίχνος RNA όπως ο ιός RNA.
Αντίστροφη μεταγραφή προτύπων RNA με υψηλή περιεκτικότητα σε GC ή σύνθετη δευτερογενή δομή.
Ροή εργασίας
Αποθήκευση και διάρκεια ζωής
Το κιτ πρέπει να φυλάσσεται στους -20°Γ. Αποθηκεύστε το προϊόν σε ψυγείο σταθερής θερμοκρασίας στους -20°Γ αμέσως μετά την παραλαβή.Εάν οι συνθήκες αποθήκευσης είναι κατάλληλες, το προϊόν δεν θα υποβαθμίσει καμία απόδοση κατά τη διάρκεια της περιόδου ισχύος του 1 έτους.
Οδηγός ανάλυσης προβλημάτων
The following is an analysis of the problems that may be encountered in the use of Lnc-RT HeroTM I (With gDNase) series kits, hoping to be helpful to your experiments. In addition, we have dedicated technical support to help you with other experimental or technical problems beyond the operating instructions and questions. If you have any needs, please contact us: 028-83361257 or E-mail: Tech@foregene.com.
Non-ειδική ενίσχυση
1. Παράλογος σχεδιασμός ασταριού
Σύσταση: Σχεδιάστε αστάρια σύμφωνα με τις αρχές σχεδιασμού ασταριών.
2. Υπολείμματα γονιδιώματος.
Πρόταση: Βεβαιωθείτε ότι το πρώτο βήμα της θερμοκρασίας αντίδρασης αφαίρεσης gDNA είναι 42°C και ότι ο χρόνος αντίδρασης μπορεί επίσης να επεκταθεί στα 5 λεπτά.
Κανένα σήμα ενίσχυσης με RT-qPCR
1. Το RNA αποικοδομείται.
Σύσταση: Το υλικό για την εκχύλιση RNA πρέπει να είναι όσο το δυνατόν πιο φρέσκο και να χρησιμοποιείται RNA υψηλής ποιότητας και καθαρότητας.
2. Το RNA περιέχει αναστολείς.
Σύσταση: Οι αναστολείς αντίστροφης μεταγραφής περιλαμβάνουν γενικά SDS, άλατα γουανιδίνης, EDTA, κ.λπ. Συνιστάται να πλένετε το ίζημα RNA με 70% αιθανόλη για την απομάκρυνση των αναστολέων.
3. Ζητήματα σχεδιασμού ασταριού.
Σύσταση: Σύμφωνα με την αρχή του σχεδιασμού του ασταριού, επανασχεδιάστε τα αστάρια για επιθεώρηση.
Η ζώνη προορισμού εμφανίζεται στο κενό στοιχείο ελέγχου
1. Μόλυνση εργαλείων ή αντιδραστηρίων λειτουργίας.
Σύσταση: Όλα τα αντιδραστήρια ή ο εξοπλισμός για το πείραμα θα πρέπει να αποστειρωθούν σε αυτόκλειστο.Να είστε προσεκτικοί και ευγενικοί κατά το χειρισμό για να αποτρέψετε την αναρρόφηση δειγμάτων DNA στην πιπέτα ή τη διαρροή έξω από το σωλήνα της φυγοκέντρησης.
2. Παρουσιάστηκε μόλυνση κατά την προετοιμασία του συστήματος αντίδρασης PCR.
Σύσταση: Λάβετε τις απαραίτητες προφυλάξεις κατά το χειρισμό, όπως: φοράτε γάντια από λατέξ, χρησιμοποιώντας άκρες φίλτρου.Χρησιμοποιήστε το Real Time PCR Mix σε ένα σύστημα ανθεκτικό στη μόλυνση.
3. Οι εκκινητές αποικοδομούνται.
Πρόταση: Χρησιμοποιήστε ηλεκτροφόρηση SDS-PAGE για να ανιχνεύσετε εάν οι εκκινητές είναι αποικοδομημένοι και αντικαταστήστε τους με νέους εκκινητές για πειράματα ανίχνευσης φθορισμού.
Εγχειρίδιο οδηγιών:
