Κιτ ForeDirect RT-qPCR
Περιγραφή κιτ:
◮Για άμεση ενίσχυση RNA σε πραγματικό χρόνο από συλλογές επιχρίσματος χωρίς διαδικασίες καθαρισμού RNA.Αυτό το κιτ ολοκληρώνει τους κύκλους qRT-PCR μέσα σε μία ώρα.Το μίγμα ενζύμων είναι ένα βελτιστοποιημένο μείγμα Αντίστροφης Μεταγραφάσης, Hot-Start Taq DNA πολυμεράσης, αναστολέας RNase.Το Reaction Buffer περιέχει όλα τα απαιτούμενα συστατικά, συμπεριλαμβανομένων των βελτιστοποιημένων συστατικών του buffer, Mg2+, dUTP και dNTP.
Περιγραφή
Το κιτ ForeDirect RT-qPCR έχει σχεδιαστεί για άμεση ενίσχυση RNA σε πραγματικό χρόνο από συλλογές επιχρίσματος χωρίς διαδικασίες καθαρισμού RNA.Αυτό το κιτ ολοκληρώνει τους κύκλους qRT-PCR μέσα σε μία ώρα.Το μίγμα ενζύμων είναι ένα βελτιστοποιημένο μείγμα Αντίστροφης Μεταγραφάσης, Hot-Start Taq DNA πολυμεράσης, αναστολέας RNase.Το Reaction Buffer περιέχει όλα τα απαιτούμενα συστατικά, συμπεριλαμβανομένων των βελτιστοποιημένων συστατικών του buffer, Mg2+, dUTP και dNTP.
Προδιαγραφές
100Τ
Εξαρτήματα κιτ
| Παράγοντας απελευθέρωσης νουκλεϊκού οξέος |
| Προστατευτικό RNA |
| 2× Ρυθμιστικό διάλυμα RT-qPCR |
| Μίγμα ενζύμων (Taq&M-MLV) |
| Οδηγίες |
Εφαρμογή PCR
1. Αφού φυγοκεντρηθούν για λίγο οι σωλήνες αντίδρασης PCR, τοποθετήστε τους στη δεξαμενή δείγματος του οργάνου ενίσχυσης.
2. Θερμικό πρωτόκολλο
| Βήμα | Θερμοκρασία | χρόνος | Κύκλοι | |
| 1 | Αντίστροφη μεταγραφή | 50℃ | 15 λεπτά | 1 |
| 2 | Προ-μετουσίωσης | 95℃ | 1 λεπτό | 1 |
| 3 | Μετουσίωσης | 95℃ | 10 δευτερόλεπτα | 42 |
| 4 | Ανοπτίωση/Επέκταση | 60℃ | 30 δευτερόλεπτα | |
Σημείωση:Το σήμα φθορισμού ανιχνεύθηκε αμέσως μετά το βήμα επέκτασης κάθε κύκλου.
3. Μετά τη ρύθμιση, αποθηκεύστε το αρχείο και εκτελέστε το πρόγραμμα αντίδρασης.
Λειτουργικά Βήματα
Πριν από την προετοιμασία του αντιδραστηρίου, όλα τα αντιδραστήρια του κιτ θα πρέπει να αποψυχθούν σε θερμοκρασία δωματίου και να αναμειχθούν απαλά.
Παρασκευή αντιδραστηρίου
1. Προετοιμάστε το μείγμα απελευθέρωσης νουκλεϊκού οξέος
| Συστατικό | Όγκος ανά δείγμα ή μάρτυρα |
| Παράγοντας απελευθέρωσης νουκλεϊκού οξέος | 5μL |
| Προστατευτικό RNA | 0,5 μL |
2. Προετοιμάστε το μείγμα αντίδρασης
| Συστατικό | Όγκος ανά δείγμα ή μάρτυρα |
| 2× Ρυθμιστικό διάλυμα RT-qPCR | 15 μL |
| Μίγμα ενζύμων (Taq&M-MLV) | 1,5 μL |
| Primers και Probes | 1μL |
Αποθήκευση και διάρκεια ζωής
-Το κιτ πρέπει να φυλάσσεται στους -20± 5℃.Η διάρκεια ισχύος είναι 12 μήνες.
-Αποφύγετε τους επαναλαμβανόμενους κύκλους κατάψυξης-απόψυξης (<5 κύκλοι).
