Άμεσο κιτ RT-qPCR
Περιγραφή κιτ:
◮ Το Direct RT-qPCR Kit, χρησιμοποιώντας Foreasy Reverse Transcriptase και Foreasy HS Taq DNA Polymerase που αναπτύσσει η Foregene, με μοναδικό ρυθμιστικό διάλυμα αντίδρασης, κάνει αυτό το κιτ με ισχυρή αντίσταση και συμβατότητα και μπορεί να δοκιμάσει απευθείας την αντίδραση χρησιμοποιώντας το σύστημα Foregene Lysis ως πρότυπο.Αυτό το κιτ μπορεί να εφαρμοστεί για την ανάπτυξη κιτ ανίχνευσης νουκλεϊκού οξέος COVID-19 και άλλων παθογόνων βακτηρίων.
Περιγραφή
Το Direct RT-qPCR Kit παρέχει χωριστά συσκευασμένο ρυθμιστικό διάλυμα RT-qPCR και ένζυμο υψηλής απόδοσηςμείγμα (Taq, M-MLV, RI), καθιστώντας το βολικό για τη δημιουργία κιτ και συστήματος back-endπροσαρμογή, μέσα σε απλή επαλήθευση.
Προδιαγραφές
500Τ, 50.000Τ
Εξαρτήματα κιτ
| Περιεχόμενα κιτ (20 μL σύστημα αντίδρασης) | IM-05111-01 | IM-05112-01 |
| 500 Τ | 50.000 Τ | |
| Άμεσο Μίγμα Ενζύμων | 500 μL×1 | 50 mL×1 |
| 2× Απευθείας ρυθμιστικό διάλυμα RT-qPCR | 1 mL× 5 | 500 mL×1 |
| Εντολή | 1 | 1 |
Λειτουργικά Βήματα
Πριν από την προετοιμασία του αντιδραστηρίου, όλα τα αντιδραστήρια του κιτ θα πρέπει να αποψυχθούν σε θερμοκρασία δωματίου και να αναμειχθούν απαλά.
A: Προετοιμάζω of πρότυπο και αντιδραστήριο
1. Προετοιμάστε προετοιμασμένο πρότυπο RNA (Συνιστάται η χρήση κιτ σειράς Foregene Total RNA Isolation Kit για την εξαγωγή και καθαρισμό του προτύπου RNA) ή δείγμα προϊόντος πυρόλυσης (Συνιστάται η χρήση του συστήματος Foregene Lysis), ειδικοί εκκινητές (10 μM) και άλλα σχετικά αναλώσιμα, όργανο.
2. Τοποθετήστε το 2× Direct RT-qPCR Buffer, RNase-Free ddH2O και 20× ROX Reference Dye (εάν's) στο κουτί με πάγο, κάνοντας τα να λιώσουν φυσικά και να αναμειχθούν απαλά.
B: Προετοιμάζω of RT-qPCR Σύστημα
Τραπέζι 1 : Προετοιμάζω of RT-qPCR sσύστημα
| Συστατικό | Ενταση ΗΧΟΥ | Τελική συγκέντρωση |
| 2× Απευθείας ρυθμιστικό διάλυμα RT-qPCR | 10 μL | 1× |
| Άμεσο Μίγμα Ενζύμων | 1μL | |
| Εμπρός αστάρι (10 μM) | 0,8 μL | 50-900 nM |
| Reverse Primer (10 μM) | 0,8 μL | 50-900 nM |
| Ανιχνευτής (4 μM) | 1μL | 200nM |
| Πρότυπο (RNA ή προϊόν λύσης) | X μL | |
| Βαφή αναφοράς 20×ROX | - | 1* |
| RNase-FreeddH2O | (6,4-X) μL | |
| Συνολικός όγκος | 20μL |
C: Σειρά ο RT-qPCR αντίδραση πρόγραμμα
Τραπέζι 2 : RT-qPCR αντιδρούνon πρόγραμμα σύνθεση (Για παράδειγμα: δύο-βήμα μέθοδος)
| Βήμα | Θερμοκρασία | χρόνος | Κύκλοι | Περιεχόμενο | |
| 1 | 50℃ | 15 λεπτά | 1* | 1 | Αντίστροφη μεταγραφή |
| 2 | 95℃ | 1 λεπτό | 1 | Προ-μετουσίωσης | |
| 3 | 95℃ | 10 δευτ | 40-45 | Μετουσίωσης | |
| 60℃ | 30 δευτ. 2* | Ανοπτίωση/Επέκταση | |||
Αποθήκευση και διάρκεια ζωής
-Το κιτ πρέπει να φυλάσσεται στους -20± 5℃.Η διάρκεια ισχύος είναι 12 μήνες.
-Αποφύγετε τους επαναλαμβανόμενους κύκλους κατάψυξης-απόψυξης (<5 κύκλοι).
